专集论文Acrostyle的蛋白质组

Acrostyle是蚜虫下颚针顶端普遍存在的食物/唾液道内表面表皮上的一个明显的解剖部位。这一保守结构引起了人们特别的兴趣,原因是它至少含有一种植物病毒即黄瓜花叶病毒Cucumbermosaicvirus的蛋白受体,推测其在植物–昆虫互作中还发挥着其他作用。之前我们报道了对acrostyle内CRR家族(因存在Rebers和Riddiford共有序列而命名)表皮蛋白的一个高度保守基序进行的免疫标记。

本研究报道了应用新手段来进一步研究这一区域的蛋白组组成,鉴定参与昆虫–病毒互作的蛋白。应用抗PR-2亚家族表皮蛋白的一系列抗体,鉴定了acrostyle内存在的其他肽。结果表明,acrostyle是一个复杂的结构,含有可进行互作的表皮蛋白的多个结构域。此外,建立了体现PR-2亚家族大部分成员多样性的具有重复序列的多肽阵列,作为遗传工具,来鉴定表皮蛋白–病原菌之间的互作。用这一阵列探测黄瓜花叶病毒粒子,结果从杂交的肽段中鉴定到了共有肽序列。应用这些新手段,拓展了昆虫下颚针蛋白组组成方面的知识,鉴定了参与病毒结合的序列,从而可进一步阐明acrostyle的不同性质和功能。

Fig.1MappingofaccessiblepeptidesoftheRR-2chitin-bindingdomainwithintheacrostyleofAcyrthosiphonpisumbyimmunolabelingwithpeptide-derivedantisera.(A)Schematicrepresentationofthelocationofpeptidesusedforantibodiesproduction.AtypicalRR-2cuticularproteinisrepresented,withthesignalpeptide(SP),andtheN-terminalandC-terminaldomainssurroundingthecentralRR-2chitin-bindingdomain.Thepeptidessequences(blackandorangelines)aretargetedupstreamanddownstreamofthepeptidepepLoftheRR-2domain.Peptideslikelytobeaccessiblewithintheacrostyleidentifiedbyimmunolabelingofdissectedindividualizedstyletsareinbold.(B)ImmunolabelingofA.pisumstyletsshowingvarietyoflabelingseenwithstyletsbothundigested(untreated,toprow)anddigestedfor15minwithchitinase(chitinase,bottomrow).Scalebarsof5μmareincluded.Immunolabelingisshownforanti-pepS,anti-pepL,anti-Ap2-05,anti-Ap2-08,andanti-Ap2-09antibodies.

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Webster,C.G.,Thillier,M.,Pirolles,E.,Cayrol,B.,Blanc,S.andUzest,M.()Proteomic







































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